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KOD DNA聚合酶

簡要描述:

KOD DNA聚合酶是從日本鹿兒島縣小寶(Kodakara)島的含硫氣孔中分離出來的超嗜熱原始菌Thermococcus kodakaraensis KOD1分離出來的、具有高擴增能力和高保真性的DNA聚合酶。它與傳統的酶(如Taq DNA聚合酶和Pfu DNA聚合酶)相比,可以更快更準確的達到PCR擴增效果。它的特點如下:

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KOD DNA聚合酶

250 U

597元

 

KOD DNA聚合酶是從日本鹿兒島縣小寶(Kodakara)島的含硫氣孔中分離出來的超嗜熱原始菌Thermococcus kodakaraensis KOD1分離出來的、具有高擴增能力和高保真性的DNA聚合酶。它與傳統的酶(如Taq DNA聚合酶和Pfu DNA聚合酶)相比,可以更快更準確的達到PCR擴增效果。它的特點如下:
1. 具有強力的3'→5'核酸外切酶活性(校正活性),可準確地對目的片段進行擴增。
2. KOD酶的保真性是Taq酶的約50倍,優化后的PCR反應緩沖液使得其擴增速度達到Taq酶的2倍,Pfu酶的6倍。
3. 可擴增結構復雜的DNA模板,如富含GC和復雜二級結構的模板。
4.  主要應用于PCR克?。ㄆ侥┒丝寺。?,長片段高保真擴增,突變修復,測序反應,復雜模板擴增等。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會完全分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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